L-ittestjar tal-PCR (reazzjoni fil-katina tal-polimerażi) huwa teknoloġija ċentrali fid-dijanjostika molekulari. L-istandardizzazzjoni tal-proċessi tal-imballaġġ u l-ittestjar tagħha tħalli direttament l-eżattezza u l-bijosikurezza tar-riżultati. Dan l-artikolu jipprovdi perspettiva professjonali dwar il-punti ewlenin tal-kontroll tal-kwalità matul il-proċess tal-ittestjar tal-PCR.
Irċevuta tal-kampjun u trattament minn qabel huma l-ewwel passi fil-proċess. Il-laboratorji għandhom jivverifikaw strettament l-identifikazzjoni tal-kampjun, il-kundizzjonijiet tat-trasport, u l-ħin tal-ħażna biex jiżguraw l-integrità tal-kampjun. Malli tirċievi, il-kampjuni għandhom jiġu nnumerati u rreġistrati f'kabinett tal-bijosikurezza u jgħaddu minn proċeduri ta 'pproċessar PRE - bħal lisi u estrazzjoni ta' aċidu nuklejiku bbażati fuq it-tip ta 'test. Sistema ta 'verifika tal-persuna b'żewġ - hija meħtieġa matul dan l-istadju biex tevita kontaminazzjoni inkroċjata -.
Il-preparazzjoni tas-sistema ta 'reazzjoni tal-PCR għandha titwettaq ġewwa bank nadif. L-operaturi għandhom jilbsu tagħmir protettiv tal-livell 3 u jużaw nuclease - konsumabbli b'xejn. Il-preparazzjoni tar-reaġent taderixxi mal-prinċipju "fluss tax-xogħol unidirezzjonali", li tiċċaqlaq miż-żona ta 'preparazzjoni tar-reaġent maż-żona tal-ipproċessar tal-kampjun u mbagħad għaż-żona ta' amplifikazzjoni. Kontrolli negattivi, kontrolli pożittivi, u kontrolli interni għandhom jiġu inklużi f'kull lott ta 'reazzjoni biex tissorvelja l-validità sperimentali.
Matul il-fażi ta 'amplifikazzjoni u ttestjar, l-istrument PCR għandu jkun pre-- parametri ta' ċikliżmu kalibrati u temperatura vverifikati. Il-proċedura ta 'reazzjoni tipikament tinkludi tliet passi: denaturazzjoni (94 - 95 grad), ttremprar (50-65 grad), u estensjoni (72 grad). In-numru ta 'ċikli huwa aġġustat abbażi tal-mira ta' skoperta. Il-PCR tal-fluworexxenza f'ħin reali jirrikjedi wkoll il-monitoraġġ tal-limitu tas-sinjal tal-fluworexxenza ta 'kanali speċifiċi.
L-analiżi u r-rappurtar tar-riżultati għandhom jitwettqu minn tekniċi kwalifikati. Id-dejta mhux ipproċessata għandha tiġi riveduta minn mill-inqas żewġ professjonisti biex tikkonferma l-morfoloġija tal-kurva tal-amplifikazzjoni, il-plawżibilità tal-valur CT, u l-konformità tal-materjali tal-kontroll tal-kwalità mal-istandards. Ir-rapport finali għandu jinkludi informazzjoni dwar il-metodoloġija tat-test, il-bażi għall-interpretazzjoni tar-riżultati, u dikjarazzjoni tal-limitazzjonijiet tat-test.
Il-proċess kollu jaderixxi strettament ma 'ISO 15189 u l-ispeċifikazzjonijiet CDC rilevanti. Sistema ta 'garanzija tripla ta' monitoraġġ ambjentali, manutenzjoni tat-tagħmir, u taħriġ tal-persunal hija implimentata biex tiżgura l-affidabbiltà u t-traċċabilità tal-ittestjar tal-PCR.